در آزمایش‌های بیولوژیکی، فیلتراسیون استریل یک عملیات رایج برای حذف میکروارگانیسم‌ها از محلول برای جلوگیری از آلودگی و تضمین استریل بودن محصول است. در این فرآیند، انتخاب و استفاده از غشاهای فیلتر اهمیت ویژه ای دارد. Tris-HCL به عنوان یک بافر متداول، اغلب نیاز به فیلتر و استریل شدن در آزمایشگاه دارد تا از صحت و قابلیت اطمینان آزمایش اطمینان حاصل شود. بیایید روی الزامات بافر Tris-HCl برای غشای فیلتر در فرآیند فیلتراسیون و استریل کردن تمرکز کنیم.
1. ویژگی های Tris-HCL
Tris-HCL بافری است که از تریس (تری متیل آلامینو متان) و اسید هیدروکلریک (HCl) تشکیل شده است. اغلب در آزمایش ها برای تنظیم مقدار pH سیستم های بیولوژیکی و حفظ پایداری واکنش ها استفاده می شود. با این حال، هنگامی که آزمایش با Tris-HCL انجام می شود، اغلب لازم است میکروارگانیسم ها از آزمایش حذف شوند تا از آلودگی آزمایش جلوگیری شود و بر دقت نتایج تأثیر بگذارد.
2. اهمیت فیلتراسیون و استریلیزاسیون
استریلیزاسیون با فیلتراسیون یک روش آزمایشی رایج است که میکروارگانیسم هایی مانند باکتری ها، قارچ ها و ویروس ها را از مایعات حذف می کند. اهداف اصلی استریل کردن فیلتراسیون Tris-HCL عبارتند از:
(1) جلوگیری از آلودگی: وجود میکروارگانیسم‌ها ممکن است منجر به آلودگی نمونه‌های آزمایشی شود و در نتیجه با نتایج آزمایشی تداخل ایجاد کند.
(2) از تجهیزات آزمایشی محافظت کنید: وجود میکروارگانیسم ها نه تنها بر نمونه های آزمایشی تأثیر می گذارد، بلکه ممکن است باعث خوردگی یا آسیب به تجهیزات آزمایشی شود.
3. مواد و ساختار غشاء فیلتر
هنگام انجام فیلتراسیون و استریلیزاسیون بافر Tris-HCl، لازم است مواد غشایی و ساختار مناسب انتخاب شود. امتیاز انتخاب به شرح زیر است:
(1) مواد غشای فیلتر باید بتواند در برابر خوردگی شیمیایی Tris-HCl مقاومت کند و خواص فیزیکی و اثر فیلتراسیون پایدار را حفظ کند. مواد غشایی متداول عبارتند از پلی اتر سولفون (PES)، پلی تترا فلوئورواتیلن (PTFE)، نایلون و غیره. این مواد از نظر شیمیایی و حرارتی پایدار هستند و برای نیازهای فیلتراسیون در محدوده وسیعی از pH مناسب هستند.
(2) ساختار غشای فیلتر نیز باید در نظر گرفته شود، اندازه منافذ به طور مستقیم بر اثر فیلتراسیون و ظرفیت نگهداری تأثیر می گذارد، و اندازه منافذ باید با توجه به نیازهای آزمایش یا تولید انتخاب شود، نه تنها برای اطمینان از کافی اثر فیلتراسیون، بلکه برای جلوگیری از نشت فیلتر ناشی از اندازه منافذ بیش از حد.
(3) به ضخامت، استحکام مکانیکی و انعطاف پذیری غشای فیلتر توجه کنید تا اطمینان حاصل شود که شکستن یا تغییر شکل آن در طول فرآیند فیلتراسیون آسان نیست.
4. استفاده و نگهداری از غشاء فیلتر
1. پیش تصفیه: قبل از فیلتراسیون، غشای فیلتر باید به طور کامل از قبل تصفیه شود، از جمله شستشو با آب استریل، خیساندن، بررسی اینکه آیا آسیب یا نقص وجود دارد و غیره، پیش تصفیه مرحله کلیدی برای اطمینان از اثر فیلتراسیون است.
2. نصب و راه اندازی: غشای فیلتر را به درستی طبق روش های عملیاتی نصب کنید تا از آب بندی خوب و عدم نشتی اطمینان حاصل کنید. برای جلوگیری از آسیب رساندن به غشا یا تأثیر بر اثر فیلتراسیون باید از فشار بیش از حد در حین کار اجتناب شود.
3. تمیز کردن و ضد عفونی کردن: به طور منظم غشاء فیلتر را تمیز و ضد عفونی کنید تا آلودگی های میکروبی احتمالی و بقایای ناخالصی از بین برود. ماده تمیزکننده و روش ضد عفونی مناسب را با توجه به وضعیت واقعی انتخاب کنید و اطمینان حاصل کنید که عملکرد غشای فیلتر پس از تمیز کردن و ضد عفونی تحت تأثیر قرار نمی گیرد.
4. ذخیره سازی: غشای فیلتر باید در مکانی خشک، خنک و عاری از گرد و غبار، اجتناب از نور مستقیم خورشید و محیط با دمای بالا نگهداری شود. در عین حال، تاریخ انقضا و یکپارچگی غشای فیلتر باید به طور مرتب بررسی شود تا قبل از استفاده از سالم بودن آن اطمینان حاصل شود.
فیلتراسیون و استریلیزاسیون Tris-HCl یکی از مراحل متداول در عملیات آزمایشگاهی است و انتخاب غشاهای فیلتر مناسب نقش مهمی در پیشرفت آرام آزمایش دارد. هنگام انتخاب یک غشاء، محققان باید ویژگی های Tris-HCl را در نظر بگیرند تا اطمینان حاصل کنند که غشای انتخاب شده می تواند نیازهای آزمایش را برآورده کند.
